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Prevalencia de mastitis bovina y microorganismos asociados

Prevalencia de mastitis bovina y microorganismos asociados
Published on: Mar 4, 2016
Published in: Technology      
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Transcripts - Prevalencia de mastitis bovina y microorganismos asociados

  • 1. Rev. Salud Anim. Vol. 33 No. 1 (2011): 57-64 PREVALENCIA DE MASTITIS BOVINA SUBCLÍNICA Y MICROORGANISMOS ASOCIADOS: COMPARACIÓN ENTRE ORDEÑO MANUAL Y MECÁNICO, EN PERNAMBUCO, BRASIL A.K. Ruiz* , P. Ponce* , G. Gomes** , R.A. Mota** , Elizabeth Sampaio** , E.R. Lucena** , S. Benone*** *Centro de Ensayos para el Control de la Calidad de la Leche y Derivados Lácteos (CENLAC), Centro Nacional de Sanidad Agropecuaria (CENSA), Cuba. **Departamento de Medicina Veterinaria de la Universidad Federal Rural de Pernambuco (UFRPE), Brasil. ***Departamento de Zootecnia de la UFRPE, Brasil. RESUMEN: Se estudiaron 11 propiedades productoras de leche bovina del estado de Pernambuco, Brasil; seis con ordeño manual y cinco con ordeño mecánico. Los rebaños estaban constituidos por animales de varias razas, edades y periodos de lactación. Se tomaron muestras de 185 vacas, resultando en 708 cuartos muestreados. Antes de colectar se realizó la prueba de California (CMT), con independencia de este resultado fueron colectadas muestras para cultivo microbiológico y conteo de células somáticas (CCS) y composición. Se obtuvieron prevalencias de 39,3% y 54,8% (CMT), 57,2% y 63,3% (diagnóstico microbiológico), 33,4% y 49,4% (CCS), para ordeño manual y mecánico respectivamente. Se aislaron microorganismos patógenos en el 61% de las muestras con mayor prevalencia para Corynebacterium sp. (45,0%), Staphylococcus sp. (29,6%) y Streptococcus sp. (14,6%) en ordeño manual; Staphylococcus sp. (36,4%), Corynebacterium sp. (27,6%), Micrococcus sp. (15,6%) y Streptococcus sp. (12,9%) en ordeño mecánico. Los rebaños ordeñados mecánicamente tuvieron mayor prevalencia de mastitis subclínica, tanto para el diagnóstico por CMT, como para CCS y cultivo bacteriológico; con diferencias significativas en CMT y CCS. El patrón de sensibilidad de los patógenos hallados indicó mayor susceptibilidad hacia la combinación Neomicina-Bacitracina- Tetraciclina (NBT), Florfenicol (FLF), Cefquinome (CEQ) y Enroflorxacina (ENO) en ese orden; la Oxacilina (OXA) resultó ser el antimicrobiano con menor porciento de sensibilidad entre los patógenos. (Palabras clave: mastitis; ordeño manual; ordeño mecánico; prevalencia; Staphylococcus spp.; Corynebacterium spp.; Streptococcus spp.; sensibilidad antibióticos) COMPARISON OFMANUALAND MECHANICALMILKING: PREVALENCE OF SUBCLINICALMASTITISAND MICROORGANISMSASSOCIATED WITH MASTITIS, IN PERNAMBUCO, BRAZIL ABSTRACT: Eleven dairy properties from Pernambuco State in Brasil were studied; six with hand milking and five with machine milking. The herds were constituted by animals of several races, ages and lactation periods. 185 cows were studied, resulting in 708 quarters sampled. Before sampling, the California Mastitis Test (CMT) was carried out independently of this result samples were collected for microbiologic cultures and Somatic Cells Counts (SCC) and milk composition. Prevalencies of 39,3% and 54,8% (CMT); 57,2% and 63,3% (microbiologic culture); 33,4% and 49,4% (SCC) were obtained for hand and machine milking respectively. Pathogens were isolated in 61% of the samples with higher prevalence for Corynebacterium sp. (45.0%), Staphylococcus sp. (29.6%) and Streptococcus sp. (14.6%) in hand milking; Staphylococcus sp. (36.4%), Corynebacterium sp. (27.6%), Micrococcus sp. (15.6%) and Streptococcus sp. (12.9%) in machine milking. Mechanically
  • 2. Rev. Salud Anim. Vol. 33 No. 1 (2011) 58 milked herds had higher prevalence of subclinical mastitis, both for diagnosis by CMT, as for CCS and bacteriological culture with significant differences in CMT and CCS. The sensibility pattern of the pathogens indicated bigger susceptibility for the combination Neomicine-Bacitracine-Tetracicline (NBT), Florfenicol (FLF), Cefquinome (CEQ) and Enroflorxacine (ENO) in that order; Oxaciline (OXA) was the antimicrobial with smaller percent of sensibility among the pathogens. (Key words: mastitis; hand milking; machine milking; prevalence; Staphylococcus spp.; Corynebacterium spp.; Streptococcus spp.; antibiotics sensibility) siderando las características de los patógenos involucrados para que el programa sea lo más eficien- te posible (10). En la condiciones del trópico americano se han reali- zado pocos trabajos encaminados a evaluar las diferen- cias entre ordeño manual y mecánico; sin embargo, se ha encontrado diferencias significativas en cuanto a pre- valencia de infecciones intramamarias, prevalencia de mastitis subclínica y clínica, incidencia, conteo total de microorganismos mesófilos aerobios y coliformes, así como en los microorganismos aislados (6, 11). Estos mismos autores reportan en experimentos realizados en México y Venezuela mayor prevalencia de mastitis bovi- na subclínica en animales con ordeño manual, contraria a la opinión general entre los productores cubanos, avaladaporalgunosresultados(12).Teniendoencuenta lo anterior y con el objetivo de contribuir a la diferencia- ción microbiológica y epizootiológica de la mastitis en ordeñomanualymecanizadoenlascondicionesdelnor- deste brasilero, se realizó el presente trabajo. MATERIALESYMÉTODOS Fueron estudiadas 11 propiedades productoras de leche bovina, seis con ordeño manual y cinco con or- deño mecánico distribuidas en cinco municipios del estado de Pernambuco, comprendiendo tres meso re- giones; Mata Atlántica (Paudalho); Región Metropoli- tana de Recife (Camaragibe) yAgreste (Gravatá, São Bento do Una y Bom Conselho). Los rebaños estaban constituidos por animales de varias razas, edades y periodos de lactación, criados en sistema intensivo y semi-intensivo. El trabajo fue realizado en los meses de mayo a julio del 2008 (periodo lluvioso). MUESTREOS Se colectaron muestras de 185 vacas, resultando en 708 cuartos muestreados.Antes de colectar se rea- lizó la prueba de California (CMT). Los resultados del CMT fueron recodificados como 0 (negativo y trazas), 1 (1+), 2 (2+) y 3 (3+) para su análisis. Independiente- mente del resultado del CMT, fueron colectados 10mL de leche en tubos de ensayos estériles según la meto- INTRODUCCIÓN A pesar de los métodos modernos establecidos para el control de la mastitis bovina, esta es una de las mayores causas de serias pérdidas económicas en la producción lechera, sufrimiento animal, efectos nega- tivos en la calidad de leche, y reducción en la higiene del producto (1). Dos características son distintivas de la pecuaria lechera brasileña: ocurre en todo el territorio nacional; y no existe un patrón de producción, por lo que la hete- rogeneidad de los sistemas de producción es muy gran- de (2). La productividad y la calidad de la leche brasile- ña son muy variables entre los estados; esto se debe a las características propias de cada región, como: el perfil del productor, el mayor acceso a la asistencia técnica, a los programas regionales de control sanita- rio del rebaño y la presencia de lecherías con políticas serias de pago por calidad (3). Gran parte de la pro- ducción de leche proviene de pequeños y medianos productores, con rebaños cruzados, los cuales aún utilizan el ordeño manual (4, 5). Desde el punto de vista sanitario la forma de orde- ñar al ganado resulta importante en el estado de salud de las ubres y en la calidad de la leche que se produ- ce, la carga bacteriana varía significativamente entre métodos de ordeño (6). Los resultados del examen microbiológico pueden ser usados para la adopción de medidas específicas de control, identificación de patógenos emergentes, segregación y descarte de animales con infección cró- nica, evaluación de la eficacia de tratamientos y esta- blecimiento de patrones de susceptibilidad a antimicrobianos (7). La etiología de la mastitis clínica y subclínica mues- tra diferencias entre regiones y países (8). Teniendo en cuenta este comportamiento es fundamental identifi- car los microorganismos circulantes antes de consi- derar cualquier control de la enfermedad (9). La adopción de un programa de control y preven- ción de la mastitis por los productores, debe ser con-
  • 3. Rev. Salud Anim. Vol. 33 No. 1 (2011) 59 dología descrita por Rabello et al. (13), así como 40 mL en frascos plásticos estériles que contenían una pastilla de Bronopol. Las muestras fueron acondicio- nadas en cajas isotérmicas con hielo reciclable. Las muestras en tubos de ensayo se llevaron al Laborato- rio de Enfermedades Infecto-Contagiosas del Departa- mento de Medicina Veterinaria, de la Universidad Fe- deral Rural de Pernambuco, donde se realizó el cultivo microbiológico. ANALISIS BACTERIOLÓGICO De cada muestra, fueron sembradas alícuotas de 0,1 mL en Placas de Petri con Agar Base Sangre Co- lumbia (Oxoid) más 5% de sangre desfibrinada de car- nero e incubadas a 37ºC por 24 a 48 horas. Los aisla- dos obtenidos fueron replicados según fue necesario, para pruebas bioquímicas, antibiogramas y conserva- ción del aislamiento. La identificación presuntiva de los microorganismos fue realizada por las característi- cas de la colonia y morfo-tintoriales por la técnica de Gram, así se identificaron Candida sp., Streptococcus sp. y Corynebacterium sp.; en el caso de Streptococcus sp. es definitorio el resultado de la catalasa (negativo). Para la identificación de Corynebacterium bovis se empleó el medio Agar Triptona Soya y este medio más Tween 80, más el resultado de la catalasa (positivo). Los agentes Gram- negativos fueron identificados a través de pruebas bioquímicas según lo establecido por Koneman (14): producción de ureasa, reacción en Agar Tres Azúca- res Hierro (TSI), prueba de Rojo de Metilo, prueba VP (Voges-Proskauer), prueba en Agar SIM (Indol y Motilidad) y test en Agar Citrato. Para la identificación de los aislamientos de Staphylococcus spp. fueron realizadas pruebas bioquímicas como producción de coagulasa libre, DNAsa y Catalasa, de acuerdo con Vasconcelos (7). Las pruebas de producción de acetoína, fermentación de la glucosa (anaerobiosis) y del manitol (aerobiosis e anaerobiosis) fueron realizadas según lo establecido por Koneman (14). Después de la realización de las pruebas, los ais- lados fueron clasificados en Staphylococcus aureus, cuando resultó positivo en todas las pruebas, Staphylococcus coagulase positiva (E.C.P.), cuando resultó positivo para la producción de coagulasa, fer- mentación de la glucosa en anaerobiosis y Catalasa, pero negativo en algunas de las otras prueba y, Staphylococcus coagulase negativa (E.C.N.), cuando sólo fermentaba la glucosa en anaerobiosis y producía catalasa (15). Las pruebas de sensibilidad antimicrobiana in vitro de los aislamientos fueron realizadas de acuerdo a la técnica de difusión de disco en Agar Mueller Hinton de acuerdo a lo recomendado por Bauer (16) y la interpre- tación del halo de inhibición formado por el antibiótico según lo establecido por el fabricante. Se utilizaron los siguientes discos de antibióticos: Enroflorxacina (5 μg) (ENO), Sulfametoxazol (25 μg) + Trimetoprim (25 μg) (SUT), Florfenicol (30 μg) (FLF), Penicilina (40 μg) + Novobiocina (40 μg) (PNM), Cefquinome (30μg) (CEQ), Neomicina (30 μg) + Bacitracina (10 μg) + Tetraciclina (30 μg) (NBT) y Oxacilina (1 μg). La leche en frascos plásticos fue enviada al Labo- ratorio PROGENE de la Facultad de Zootecnia de la UFRPE para realizar el conteo de células somáticas (CCS) y la composición físico-química mediante los equipos Bentley Somacount 300 y Bentley 2000 res- pectivamente. Para el análisis de los datos se empleó el paquete estadístico computadorizado STATGRAPHICS Plus para Windows 5.1. RESULTADOSYDISCUSIÓN Los resultados de prevalencia de mastitis subclínica obtenidos mediante CMT, cultivo bacteriológico y conteo de células somáticas se muestran en las Tablas 1, 2 y 3, respectivamente. TABLA 1. Prevalencia de Mastitis subclínica por CMT / Subclinical mastitis prevalence by CMT Total Ordeño manual Ordeño mecánico Cuartos evaluados 684 425 259 >=1+ 309 167 142 % 45,2 % a 39,3 % a 54,8 % b >=2+ 173 91 82 % 25,3% ab 21,4 % a 31,7 % b Proporciones con diferentes superíndices en la misma fila difieren significativamente para P<0,01.
  • 4. Rev. Salud Anim. Vol. 33 No. 1 (2011) 60 Analizando estadísticamente los resultados, en ambos niveles de CMT (>1+ y >2+) encontramos dife- rencia significativa para el tipo de ordeño, favorable (menor prevalencia) al ordeño manual; lo mismo ocu- rre con la prevalencia según el CCS (para ambos nive- les); en el caso del cultivo microbiológico no hay dife- rencia significativa, pero es menor en ordeño manual. Estos resultados demuestran una menor prevalencia de mastitis subclínica en las unidades con ordeño manual. Los resultados de cuartos positivos al CMT (>1+) analizados según el ordeño difieren con lo reportado por otros investigadores (17), quienes encontraron una proporción de cuartos con reacción 2+ y 3+ mayor (34,82%) para los animales en ordeño manual, con respecto a los ordeñados a máquina (29,64%). Otros trabajos (6) han obtenido resultados de prevalencia de mastitis menores en ordeño mecánico al comparar con ordeño manual, pero utilizando un número mucho me- nor de animales y fincas, la realidad en nuestra región hace que, generalmente y si se analiza un número representativo de vaquerías, sea menor la prevalencia en ordeño manual, pues no se garantizan en las pro- piedades las condiciones y materiales necesarios para efectuar el ordeño mecánico con calidad. Tanto el total como en el ordeño manual y mecáni- co por separado se halló menor prevalencia en el re- sultado del CMT que mediante el aislamiento de microorganismos. González y Wilson (18) estiman la sensibilidad del CMT ante Staphylococcus aureus y Streptococcus agalactiae en 66 y 72 %, esto explica parte de la diferencia de prevalencia de mastitis subclínica detectada mediante CMT o cultivo bacterio- lógico, pues se aislaron estos microorganismos. Pue- de ocurrir que la infección bacteriana esté comenzan- do y no haya ocurrido aún la respuesta inflamatoria. Para determinar la validez del CMT en la identifica- ción de cuartos infectados, se calculó la sensibilidad, especificidad y efectividad para los valores umbrales de >1+ y >2+ en cada tipo de ordeño. Estos resulta- dos se muestran en la Tabla 4. La sensibilidad fue cal- culada como la proporción de cuartos positivos al cul- tivo que tenían valores para el CMT superiores al um- bral seleccionado; la especificidad fue la proporción de cuartos negativos al cultivo que tenían valores de CMT por debajo del umbral evaluado y la efectividad fue la proporción de verdaderos positivos y negativos. Faría et al. (11) obtuvieron resultados de sensibili- dad, empleando también el aislamiento de microorganismos como criterio de veracidad, que difie- ren de los obtenidos aquí pues son mayores para el ordeño manual en ambos criterios. En cuanto a la es- pecificidad encontraron mayor especificidad en el or- deño manual para >=1 y en el ordeño mecánico para >=2. La efectividad estuvo cercana a los valores repor- tados en sus investigaciones para el ordeño manual, siendo nuestros valores mejores en el caso del ordeño mecánico, sobre todo para >=1. Al igual que Sargeant TABLA 2. Prevalencia de mastitis subclínica por aislamientos de microorganismos./ Prevalence of subclinical mastitis by microorganisms isolations Aislamiento microbiológico Total O. manual O. mecánico Cuartos evaluados 684 425 259 Positivos 417 243 164 % 59,5 a 57,2 a 63,3 a Proporciones con diferentes superíndices en la misma fila difieren significativamente para P<0,01. TABLA 3. Prevalencia de mastitis subclínica por CCS (>= 200.000 y >= 400.000 células/mL)./ Prevalence of subclinical mastitis by SCC (>= 200.000 & >= 400.000 cells/mL) Total O. manual O. mecánico Cuartos evaluados 675 416 259 >= 200.000 cel./mL 267 139 128 % 39,6 a 33,4 a 49,4 b >= 400.000 cel./mL 190 95 95 % 28,1 ab 22,8 a 36,7 b Proporciones con diferentes superíndices en la misma fila difieren significativamente para P<0,01.
  • 5. Rev. Salud Anim. Vol. 33 No. 1 (2011) 61 et al. (19) encontramos que al elevar el nivel para clasi- ficar en sanos y enfermos disminuye la sensibilidad y aumenta la especificidad. De acuerdo a las medias halladas en el CCS para el ordeño manual y mecánico, 8,16x105 y 1,22x106 células/mL respectivamente, se tomó como patrón para definir entre cuartos sanos y enfermos 2x105 células/ mL, comúnmente usado (20). A partir de ese valor se halló la prevalencia de mastitis global, y desglosada en ordeño manual y mecánico que se muestra en la Tabla 3. Para determinar el grado de asociación entre los resultados del CMT y el conteo de células somáticas se halló la correlación, que fue de 0,42 en total, 0,68 para el ordeño manual y 0,29 en el ordeño mecánico. Una correlación mayor en el ordeño manual y menor en el mecánico con relación al resultado de 0,42 y 0,55 respectivamente obtenido por Faría et al. (11). Esta misma correlación pero hallada con respecto al log10 del CCS resultó mayor 0,81 en total, 0,84 para el orde- ño manual y 0,76 en el ordeño mecánico. Del total de cuartos examinados, cuatro (0,56%) presentaron mastitis clínica, 331 mastitis subclínica (46,75%) y 373 (52,7%) resultaron negativos. Al comparar los resultados del CMT con el examen microbiológico se obtuvo que de los 331 cuartos mamarios con mastitis subclínica, solamente 50 (15,1%) resultaron negativos al examen microbiológi- co, indicando posibles procesos inflamatorios de etio- logía no bacteriana, en un por ciento menor a lo repor- tado en el mismo estado, por Freitas et al. (21) que obtuvieron 36,7% de negatividad en el examen micro- biológico cuando el CMT fue positivo. Los microorganismos aislados en 708 muestras de leche se presentan en la Tabla 5. Los agentes de mayor prevalenciageneralfueronCorynebacteriumsp.(37,4%), Staphylococcus sp.(32,8%)yStreptococcussp.(13,9%) difiriendo de lo hallado por Freitas et al. (21) quienes encontraron con mayor prevalencia al Staphylococcus sp. (49,6%) seguido por Corynebacterium sp. (34,4%) para la mesorregión delAgreste Pernambucano. Comparando los tipos de ordeño, de manera gene- ral son los mismos grupos de microorganismos, sin diferencia significativa para Staphylococcus sp. y Streptococcus sp. en el caso de Corynebacterium sp. se encontró una diferencia significativa con mayor pre- valencia del patógeno en el ordeño manual, resultado similar al encontrado por Faría et al. (11), que justifica parte de los resultados menores en CCS y CMT del ordeño manual, pues varios investigadores (22, 23), han sugerido que los cuartos infectados con Corynebacteriumbovis,tienenunefectoprotectorcontra infecciones subsecuentes provocadas por patógenos mayores de la mastitis (Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae). TABLA 4. Sensibilidad, especificidad y efectividad del CMT / Sensibility, specificity and effectiveness of the CMT Tipo de ordeño Resultado Sensibilidad Especificidad Efectividad >=1+ 0,531 0,903 0,697Ordeño manual >=2+ 0,321 0,946 0,595 >=1+ 0,762 0,906 0,819Ordeño mecánico >=2+ 0,451 0,979 0,649 TABLA 5. Prevalencia de microorganismos./ Prevalence of microorganisms Total O. Manual O. MecánicoMicroorganismos # % # % # % Staphylococcus spp. 165 32,8 a 83 29,6 a 82 36,4 a Streptococcus sp. 70 13,9 a 41 14,6 a 29 12,9 a Corynebacterium sp. 188 37,4 ab 126 45,0 a 62 27,6 b Micrococcus sp. 42 8,3 a 7 2,5 b 35 15,6 c Bacillus sp. 17 3,4 12 4,3 5 2,2 Candida sp. 1 0,2 1 0,4 0 0,0 Escherichia coli 9 1,8 6 2,1 3 1,3 Bacilos Gram Neg. 13 2,6 4 1,4 9 4,0 Total 505 100 280 100 225 100 Proporciones con diferentes superíndices en la misma fila difieren significativamente para P<0,01.
  • 6. Rev. Salud Anim. Vol. 33 No. 1 (2011) 62 De 165 aislados de Staphylococcus sp. Se selec- cionaron aleatoriamente 54 (32,7%) para la caracteri- zación bioquímica. De estos, se identificaron 26 (48,1%) como Staphylococcus aureus, 19 (35,2%) como Staphylococcus Coagulasa Negativa (E.C.N.) y 9 (16,7%) como Staphylococcus Coagulasa Positiva (E.C.P.). Corroborando lo encontrado por otros autores que obtuvieron una mayor prevalencia de S. aureus (66,4%) en elAgreste de Pernambuco, (24). Se realizó el test de sensibilidad frente a los antimicrobianos en 94 (18,6%) de los 505 microorganismos aislados, De este subtotal, 27 (28,7%) eran Corynebacterium spp., 36 (38,3%) Staphylococcus spp., 18 (19,1%) Streptococcus spp., siete (7,4%) Micrococcus spp. y seis (6,4%) Escherichia coli. El perfil de sensibilidad antimicrobiana se muestra en la Figura 1. Para los aislamientos de Corynebacterium spp. se encontró 100% de sensibili- dad para los antimicrobianos ENO, FLF y NBT y para la OXA apenas 33% de sensibilidad. Para los aislados de Staphylococcus spp., se halló 100% de sensibili- dad para el NBT y 50% para la OXA, contrario a lo expresado por Brito: que la resistencia a la oxacilina es infrecuente en estafilococos aislados de glándulas mamarias bovinas en Brasil, (25). Para los aislamientos de Streptococcus spp. la sensibilidad fue de 100% para los antimicrobianos: FLF y NBT, para la OXAsólo 19%. En el caso de la asocia- ción PNM la sensibilidad fue de 94%, siendo mayor que la obtenida por Owens et al. (26) experimentando la Penicilina y la Novobiocina separadamente, 84 y 85% respectivamente. El perfil de sensibilidad de tres aislados de Escherichia coli fue de 100% para los antibióticos NBT e FLF, y 100% resistente para la OXA. Siete (19,44%) del total de aislados de Staphylococcus spp. utilizados en los tests de sensi- bilidad antimicrobiana, fueron resistentes a dos o más antimicrobianos. En el caso de los aislamientos de Streptococcus spp. sólo dos (11,1%) fueron multirresistentes, y de los aislamientos de Escherichia coli cuatro (66,6%). La asociación Neomicina-Bacitracina-Tetraciclina, fue la más eficaz frente a los patógenos estudiados, principalmente por ser un medicamento reciente y por ende poco utilizado en el mercado brasileño. El uso indiscriminado de la Oxacilina tiene mucho que ver con el alto grado de resistencia de los aislamientos. CONCLUSIONES 1. Los rebaños de ordeño mecánico tuvieron mayor prevalencia de mastitis subclínica, tanto para el diag- nóstico por CMT, como para CCS y cultivo bacterio- lógico. FIGURA 1. Perfil de sensibilidad antimicrobiana / Antimicrobian sensibility profile.
  • 7. Rev. Salud Anim. Vol. 33 No. 1 (2011) 63 2. El CMT resultó válido para la identificación de infec- ciones intramamarias, con mayor sensibilidad, es- pecificidad y efectividad en el ordeño mecánico. 3. Solamente Corynebacterium sp. tuvo diferencia significativa en la prevalencia de microorganismos, comparando ordeño manual y mecánico. 4. El antibacteriano más efectivo «in vitro» contra los patógenos fue la asociación Neomicina+Bacitracina +Tetraciclina (NBT), seguido de Florfenicol (FLF). 5. Los microorganismos implicados, causantes de mastitis bovina en las regiones estudiadas, mostra- ron resistencia «in vitro» a la Oxacilina (OXA). REFERENCIAS 1. Chagunda MGG Friggens NC, Rasmussen MD, Larsen T.AModel for Detection of Individual Cow Mastitis Based on an Indicator Measured in Milk. J Dairy Sci 2006;89:2980-98. 2. Zoccal R, Vasconcelos A, Junqueira R, Zamagno M.Anova pecuária leitera brasileira. III Congresso Brasileiro de Qualidade do Leite; Recife, Brasil: PROGENE, DZ-UFRPE; 2008. 3. Nero IA, Mattos MR, Beloti V, Barros MAF. Hazards in non-pasteurized milk on retail sale in Brazil: prevalence of Salmonella ssp, Listeria monocytogenes and chemical residues. Braz J Microbiol.2004;35:211-5. 4. Cavalcante FA. Manejo Necessário no Rebanho Leiteiro para uma Boa Ordenha. Acre, Brasil: EMBRAPA; 2004. 5. Costa D, Reinemann DJ, Cook N, Ruegg P. The Changing Face of Milk Quality and Milking Technology in Brazil.Wisconsin, EEUU: Babcock Institute; 2004. 6. Ávila S, Gutiérrez AJ, Sánchez JI, Canizal E. Comparación del estado de salud de la ubre y la calidad sanitaria de la leche de vacas ordeñadas manual o mecánicamente. Veterinaria México. 2002;33(4):387-94. 7. Vasconcelos MA. Importância do diagnóstico microbiológico para a detecção da mastite. III Congresso Brasileiro de Qualidade do Leite; Recife, Brasil: PROGENE, DZ-UFRPE; 2008. 8. BradleyAJ, Green MJ. Factors affecting cure when treating bovine clinical mastitis with cephalosporin- based intramammary preparations. J. Dairy Sci. 2009;92(5):1941-53. 9. PitkäläA, Hayeri M, Pyörälä S, MyllysV, Honkanen- Buzalski T. Bovine mastitis in Finland 2001 – Prevalence, distribution of bacteria and antimicrobial resistance. J Dairy Sci. 2004;87:2433- 41. 10.Nunes G, Vasconcelos MA, Lange CC, Gomes C, Castro L, Feitosa JR. Qualidade do leite de rebanhos bovinos localizados na Região Sudeste: Espírito Santo, Minas Gerais, Rio de Janeiro, Janeiro/2007 a Junho/2008. III Congresso Brasileiro de Qualidade do Leite; Recife, Brasil: PROGENE, DZ-UFRPE; 2008. 11.Faría JF, García A, D’Pool G, Valero K, Allara M, Angelosante G. Detección de mastitis subclínica en bovinos mestizos doble propósito ordeñados en forma manual o mecánica. Comparación de tres pruebas diagnósticas. Revista Científica. 2005;15(2):109-18. 12.Alfonso D, Pérez C, Silveira EA. Evaluación epizootiológica de la mastitis bovina en cuatro vaquerias. REDVET [serial on the Internet]. 2008 [cited 2009; 9(7): Available from: http:// www.veterinaria.org/revistas/redvet/n070708/ 070801.pdf. 13.Rabello RF, Souza CRVM, Duarte RS, Lopes RMM, Teixeira LM, CastroACD. Characterization of Staphylococcus aureus Isolates Recovered from Bovine Mastitis in Rio de Janeiro, Brazil. J Dairy Sci. 2005;88(9):3211-9. 14.Koneman EW. Enterobacteriaceae. Diagnostic Microbiology.5ed.Philadelphia,EEUU:Lippincott- Raven; 1989. 15.Baird-Parker AC. The Staphylococi: an introduction. JAppl Bacteriol. 1990;19:15-85. 16.Bauer AW. Antibiotic susceptibility testing by a standarized single disk method. Am J Clin Pathol. 1966;54(4):493-6. 17.Ferraro L, Scaramelli A, Troya H. Prevalencia de la Mastitis Subclínica Bovina en Venezuela y Evaluación de la Prueba de Mastitis de California (CMT) como Prueba Diagnóstica. Revista Científica. 1999;9(2):81-90.
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